RPA je jedna od nekoliko tehnika izolacije termičke amplifikacije nukleinske kiseline koja se razvija kao molekularna dijagnostička tehnika, često sa svrhom pojednostavljenja potrebnih laboratorijskih instrumenata u odnosu na PCR. Djelomični popis još tehnika izotermalne amplifikacije uključuje LAMP, NASBA, pojačavanje o helikazi (HDA) i reakciju amplifikacije niking enzima (NEAR). Tehnike se razlikuju u specifičnostima rasporeda primera i mehanizma reakcije, a u nekim slučajevima (poput RPA) koriste se kokteli od dva ili više enzima. Poput RPA, mnoge od ovih tehnika nude brzo vrijeme amplifikacije s mogućnošću pojednostavljenog instrumentiranja i prijavljuju otpornost na tvari u neprovjerenim uzorcima za koje se zna da inhibiraju PCR, Poštujući vrijeme pojačanja, moderni termociklisti s brzim temperaturnim rampama mogu smanjiti vrijeme pojačanja PCR na manje od 30 minuta, posebno za kratke amplikone koji koriste dvotemperaturno kruženje umjesto uobičajenih trotemperaturnih protokola. Isto tako, zahtjeve pripreme uzorka (uključujući lizu i ekstrakciju DNA ili RNA, ako je potrebno) treba smatrati dijelom uobičajenog vremena i složenosti svojstvene tehnici. Ovi se zahtjevi razlikuju ovisno o tehnici i specifičnom cilju i vrsti uzorka.
Slika 249A | Shematski prikaz molekularnog mehanizma za probir rekombinantnih stanica | Dylan2106 / Public domain | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Blue_white_assay_Ecoli.jpg) from Wikimedia Commons
Autor : Milos Pawlowski
Primjedbe
Objavi komentar