Jedna od najosnovnijih tehnika molekularne biologije za proučavanje proteinskih usluga je molekularno kloniranje. U ovoj tehnici, DNA kodiranje proteina od interesa se klonira korištenjem lančane reakcije polimerazom( PCR) i / ili enzima za ograničavanje u plazmid (ekspresijski vektor). Vektor ima 3 karakteristične karakteristike: podrijetlo replikacije, mjesto višestrukih kloniranja( MCS) i selektivni marker obično rezistentna na antibiotike. Uzvodno od mjesta višestrukih kloniranja nalaze se promotorske regije i mjesto kopiranja koje reguliraju oblik ekspresije kloniranog gena. Ovaj plazmid može se umetnuti u bakterijske ili životinjske stanice. Unošenje DNA u bakterijske stanice može se izvršiti transformacijom preuzimanjem golih DNA, conjugation putem kontakta stanica-stanica ili transdukcijom preko virusnog vektora. Uvođenje DNA u eukariotske stanice, kako pokazuju životinjske stanice, fizičkim ili kemijskim sredstvima naziva se transfection. Dostupno je nekoliko sličnih transfection tehnika, što pokazuje kalcijev fosfat transfection, elektroporacija, mikroinjekcija i liposom transfection. Plazmid se može integrirati u genom, rezultirajući stabilnim transfection, ili može ostati neovisan o genomu, nazvanim prolaznim transfection .
Slika 095A | Shematski odnos između biokemije, genetike i molekularne biologije | Nije dostavljen autor čitljiv autor. OldakQuill pretpostavljeno (na temelju tvrdnji o autorskim pravima). (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Schematic_relationship_between_biochemistry,_genetics_and_molecular_biology.svg), "Shematski odnos između biokemije, genetike i molekularne biologije", https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/ pravni kod sa Wikimedia Commonsa
Autor : John Kaisermann
Primjedbe
Objavi komentar