Prednji i reverzni prajmeri se kovalentno vežu uz visoku gustoću na klizač protočne ćelije. Odnos temeljnih premaza prema obrascu na nosaču određuje površinsku gustoću pojačanih skupina. Protočna ćelija izložena je reagensima za produženje na bazi polimeraze, a prajmiranje nastaje kao slobodni / udaljeni kraj ligdiranog fragmenta "mostova" do komplementarnog oligoa na površini. Ponavljana denaturacija i proširenje rezultira lokaliziranim pojačanjem DNA fragmenti u milijunima odvojenih lokacija preko površine protočne ćelije. Povećavanjem na čvrstoj fazi, dobiva se 100–200 milijuna prostorno odvojenih klasteričnih slojeva, pružajući slobodne krajeve na koje se zatim hibridizira univerzalni sekvencijalni primer za pokretanje reakcije sekvenciranja. Ta je tehnologija podnijela patent za 1997. godinu od Genex Institute of Biomedical Research (GBRI) u Genexu-Welcome, Pascal Mayer, Eric Kawashima i Laurent Farinelli, a prvi put je javno predstavljen 1998. Godine 1994. Adams i Kron podnijeli su patent na sličnu, ali ne-klonalnu operaciju površinskog pojačanja, nazvanu "pojačavanje mosta" prilagođenu za klonsko pojačanje 1997. godine od strane Church i Mitra.
Slika 155A | PacBio SMRT tehnologija i Oxford Nanopore mogu se koristiti nepromijenjeni DNA za suočavanje sa metilacijom. | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) iz Wikimedia Commons
Autor : Yavor Mendel
Primjedbe
Objavi komentar