Topoizomeraza se može radije upotrijebiti ligase za ligaciju, a kloniranje se može obaviti brže bez potrebe za ograničenjem probave vektora ili umetka. U ovom TOPO djelovanju kloniranja linearizovani vektor se aktivira vezanjem topoizomeraze I na njegove krajeve, a ovaj "TOPO-aktivirani" vektor tada može prihvatiti PCR proizvod vezanjem na oba 5 'kraja PCR proizvoda, oslobađa se topoizomeraza i u djelu se formira kružni vektor.
Homološka rekombinacija
Drugo djelovanje kloniranja bez upotrebe ligase je DNA rekombinacijom, na primjer, korištenom u sustavu kloniranja Gateway-a. Gen, jednom kloniran u klonirajući vektor (nazvan ulazni klon ovom metodom), može se povoljno uvesti u različite oblike ekspresijskih vektora rekombinacijom.
Pomoću magneta transfection
Pomoću magneta transfection je transfection akcija koja koristi magnetske interakcije za isporuku DNA u objektivne stanice. Nukleinske kiseline povezane su s magnetskim nanočesticama, a magnetska polja odvode komplekse čestica nukleinske kiseline u objektivne stanice, gdje se nukleinske kiseline oslobađaju.
Slika 092A | 9. Priprema kodecita / kodeviriona. Jednostavno pomiješajte stanice / virione s FSL otopinom (koja sadrži 1 ili više FSL-ova) i inkubirajte 10-120 minuta na 37 ° C (ili na temperaturama nižim od 4 ° C). Konstrukti će se spontano uklopiti u membranu i više nisu potrebni koraci. | Xiphiaz / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Preparation_of_kodecytes_and_kodevirions.svg) from Wikimedia Commons
Autor : John Kaisermann
Primjedbe
Objavi komentar